RPA技术就是重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性,最佳反应温度在37°C~40℃左右。
RPA的原理是:重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物,能在双链DNA中寻找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就会发生链交换反应形成并启动DNA合成,对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的DNA链与SSB结合,防止进一步替换。在这个体系中,由两个相对的引物起始一个合成事件。RPA反应速度快,用时短,特异性强。
RPA冻干技术具有很多优点:
1、冻干预分装:避免反复冻融导致的试验结果误差,避免酶等粘稠度高的组份损耗;
2、常温储运:*热稳定性,突破冷链瓶颈,释放冷库空间,减少储运成本;
3、快速检测 15min进行单分子检测试验。
4、包装形式简单,直接使用,对人员操作要求降低,不需要专业的配液操作人员。
5、 可以选择包材形式多样化,能够降低生产成本。
6、无需热循环过程,不需要配置配套的设备来进行反应的准备。
7、可批量生产,快速高效,特异。
针对RPA试剂的和LAMP及其他核酸试剂的特点,开发针对性的冻干保护剂配方,设计合理的冻干曲线,获得各种冻干形式的RPA冻干试剂.公司的Pilot T系列可以针对该试剂进行冻干,匹配度高,稳定性和可靠性好,适用范围广,针对温度和光敏感型物料设计,功能齐全。系列冻干机可以做成RPA冻干球和冻干粉,适用西林瓶,离心管、芯片盘、托盘、安瓿瓶、PCR八连管等各种容器。
Pilot T系列全功能自动冻干机技术参数
型号 | Pilot1-2T | Pilot2-4T | Pilot4-6T | Pilot5-8T | Pilot8-12T | Pilot10-15T |
冻干面积 | 0.1㎡ | 0.2㎡ | 0.42㎡ | 0.56㎡ | 0.84㎡ | 1.05㎡ |
∅22西林瓶装量(20ML) | ≥210支 | ≥400支 | ≥900支 | ≥1170支 | ≥1500支 | ≥2100支 |
∅16西林瓶装量(5ML) | ≥410支 | ≥800支 | ≥1700支 | ≥2210支 | ≥3100支 | ≥4100支 |
冷阱温度(空载) | -85℃ |
真空度(空载) | ≤1Pa |
板层温度(空载) | -55℃ |
板层制冷方式 | 硅油循环 |
板层数量 | 1+1 | 2+1 | 3+1 | 4+1 | 4+1 | 5+1 |
板层尺寸(mm) | 375*270 | 375*270 | 350*400 | 350*400 | 350*600 | 350*600 |
捕水能力 | 2L | 4L | 6L | 8L | 12L | 10L |
冻干效率 | 2L/24H | 4L/24H | 3L/24H | 5L/24H | 7L/24H | 10L/24H |
板层间距 | 130mm | 80mm | 100mm | 80mm | 90mm | 100mm |
穿墙隔离 | √ | √ | √ | √ | √ | √ |
冻干曲线拟合度 | 100% | 100% | 100% | 100% | 100% | 100% |
晶型控制 | √ | √ | √ | √ | √ | √ |
蒸汽分压控制 | √ | √ | √ | √ | √ | √ |
升华结束判定 | √ | √ | √ | √ | √ | √ |
冻干终点测试 | √ | √ | √ | √ | √ | √ |
压塞 | 液压 |
整机尺寸 (约) | W660*D1200*H1500 | W660*D1200*H1800 | W860*D1400*H1800 | W860*D1400*H1800 | W860*D1700*H1900 | W860*D1700*H1900 |