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病毒类样品冻干方法介绍

时间:2022-05-20 点击次数:347

病毒是一种个体微小,结构简单,只含一种核酸DNA或RNA,必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞型生物。病毒是一种非细胞生命形态,它由一个核酸长链和蛋白质外壳构成,病毒没有自己的代谢机构,没有酶系统。因此病毒离开了宿主细胞,就成了没有任何生命活动、也不能独立自我繁殖的化学物质。它的复制、转录、和转译的能力都是在宿主细胞中进行,当它进入宿主细胞后,它就可以利用细胞中的物质和能量完成生命活动,按照它自己的核酸所包含的遗传信息产生和它一样的新一代病毒。

冷冻干燥(Lyophilization)全称真空冷冻干燥,简称冻干,是在低温减压条件下,利用水的升华使制品低温脱水而达到干燥的一种技术。冻干在低温低氧条件下进行,多数生物反应停滞,且处理过程无液态水存在,使物料原有结构和形状得到大程度的保护。通过冻干获得的粉体硬团聚少,粒径小且均匀,已经成为制备生物制品,尤其是蛋白多肽类粉针剂的一种重要方法。

保护剂一般采用脱脂牛奶或血清、人血白蛋白、蔗糖、海藻糖、山梨醇、甘露醇等糖和多元醇类,HES淀粉、明胶、右旋糖苷、缓冲盐等。保护剂的作用机理是在冷冻干燥的脱水过程中稳定病毒结构,防止细胞膜受冷冻或干燥而造成损伤。真空冻干病毒比较稳定,可于室温短期保存, 4~8℃长期保存。此法综合利用了各种有利于毒种保存的因素,具有成活率高,变异性小等优点,是常用的较理想的毒种保存方法之一。病毒疫苗冻干主要关注的是冻干后病毒滴度、残余水分、热稳定性、抗原性及相关免疫实验。诊断不同的病毒毒株的特点采用不同的冻干保护剂组合进行冻干,冻干工艺曲线根据混合液体的玻璃态转变温度、塌陷温度、共晶点温度、共融点温度等特点进行相应的预冻温度,预冻时间,预冻工艺,升华干燥温度,升华干燥时间,升华工艺及解析工艺的相关设计。任何物质的成功冻干都离不开好的配方保护剂和相应的冻干曲线。我公司可以提供相应的冻干工艺曲线及冻干配方开发服务。


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